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Fluo-8, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針,超級純
時間:2016-07-02     作者:懋康生物     文章來源:原創    

Fluo-8, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針,超級純

最亮的Ca2+綠色熒光探針


搜索關鍵詞:

Fluo-8 AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針,超級純;Fluo-2, AM;Fluo-2 Medium Affinity,Acetoxymethyl Ester;可見光激發波長Ca2+熒光探針;Fluo-3;Fluo-4;高通量篩選 HTS Screen Assay;


Fluo-8(Fluo-2 Medium Affinity),是目前最亮的可見光激發波長Ca2+熒光探針,其熒光強度比Fluo-4強兩倍,比Fluo-3強四倍。Fluo-8具中等程度的Ca2+親和力,幾乎接近Fluo-3,Fluo-4(Fluo-3: Kd=0.4μM、Fluo-4: Kd=0.36μM、Fluo-4: Kd= 0.389μM),使用上幾乎同Fluo-3和Fluo-4。


Fluo-8不僅維持Fluo-3,Fluo-4便捷的光譜檢測特性,與Ca2+結合后的最大激發波長為490nm,最大發射波長為514nm。而且具有改善的細胞載入和Ca2+響應能力。Fluo-8加載具較弱的溫度依賴性,在室溫或37℃孵育皆染色良好,不像Fluo-3,Fluo-4嚴格要求在37℃孵育,此特征使其更適用于HTS高通量篩選實驗。Fluo-8應用廣泛,與許多細胞系和靶向樣本兼容,不會受配體或靶標本身信號干擾。Fluo-8可通過激光共聚焦顯微鏡、流式細胞儀、熒光酶標儀、熒光顯微鏡等來檢測胞內鈣離子水平的變化。Fluo-8, AM是Fluo-8的一種乙酰甲酯衍生物,具有細胞膜滲透性,只需簡單培養,即可輕易進入細胞。一旦進入細胞內,即被其內酯酶剪切生成不具膜滲透性的Fluo-8,從而滯留在胞內以發揮相應生理功能。


可見光激發Ca2+熒光探針的優勢:

與紫外光激發的熒光探針相比,如Fura-2和Indo-1,可見光激發Ca2+探針具有以下特點:

1)適用于大多數的激光共聚焦測鈣系統,包括共聚焦激發掃描顯微鏡以及流式細胞儀等。

2)具有更強的染料吸收性能,使得更低濃度的探針即可成功檢測Ca2+變化,從而降低對活細胞的光毒性。

3)Ca2+依賴性熒光強度增強,對Ca2+變化水平檢測敏感度更高。

4)降低樣品自熒光以及光散射的干擾。

5)兼容光激活探針以及UV-激發試劑,因此更方便于多參數檢測。

6)無光譜偏移。


Fluo-8, AM相比較于Fluo-3,Fluo-4的優勢:

1)目前最亮的可見光激發波長Ca2+熒光探針,熒光強度是Fluo-4的兩倍,Fluo-3的四倍;

2)熒光探針加載更靈活快速,室溫或37℃孵育染色效果好,不像Fluo-3、Fluo-4嚴格要求在37℃孵育;

3)維持Fluo-3、Fluo-4的檢測光譜特性,與Ca2+結合后的最大激發波長為490nm,最大發射波長為514nm。4)50μg小包裝供應,使用方便,且能很好保證產品的穩定性。


Fluo-8, AM的應用圖片:

Fig. 1,U2OS cells were seeded overnight at 40,000 cells per 100 μL per well in a 96-well black wall/clear bottom costar plate. The growth medium was removed, and the cells were incubated with 100 μl of 4 μMFluo-4, AMorFluo-8, AMin HHBS at 37 °C, 5% CO2incubator for 1 hour. The cells were washed twice with 200 μl HHBS, then imaged with a fluorescence microscope using FITC channel.


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Ex/Em(nm) DNA-bound   

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Fluo-3, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針,超級純

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Rhod-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針,超級純

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】


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