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PEI 25K Transfection Reagent 線性化聚乙烯亞胺轉染試劑
目錄號 MX2204-10ML 售價 880.00元
規格 10ml 運輸溫度 冰袋運輸
其他名稱 保存溫度 -20℃保存
CAS號 9002-98-6 有效期 1年
應用 轉染 訂購數量
產品簡介:

PEI 25K Transfection Reagent

線性化聚乙烯亞胺轉染試劑

搜索關鍵詞:

PEI25K;PEI 25000;PEI 40K;線性化聚乙烯亞胺PEI;PEI轉染試劑;PEI 25000;CAS:9002-98-6, 26913-06-4;Polysciences;

產品信息

產品名稱

產品編號

規格

價格(元)

PEI 25K Transfection Reagent線性化聚乙烯亞胺轉染試劑

MX2204-1ML

1ml

280

PEI 25K Transfection Reagent線性化聚乙烯亞胺轉染試劑

MX2204-10ML

10ml

880

PEI 25K Transfection Reagent線性化聚乙烯亞胺轉染試劑

MX2204-50ML

50ml

1680

【溫馨提示】:見我司整理的線性化聚乙烯亞胺PEI 25000/ PEI40000轉染試劑專題。

產品描述

線性化聚乙烯亞胺PEI 25,000,一種高電荷陽離子聚合物,非常容易結合于高電荷陰離子基質。工業應用上,線性化PEI可改善負電荷染料的物理外觀,以調整染料的化學特性和增強染料與固相基質的黏附能力,常用作黏附增強劑,作用同多聚賴氨酸(poly-lysine);科研應用上,線性化PEI能與DNA或其他負電荷生物大分子簡單結合,正是這一特性,使得成為一種非常行之有效的載體運輸介質(Vector carrier),即轉染試劑。

線性化聚乙烯亞胺PEI 25000(Polyethylenimine Linear, MW 25000)是一款優秀、低成本、值得信賴的瞬時性轉染試劑。在HEK293和CHO表達系統中,PEI在寬廣的生產規模內(從96孔板到100L生物反應器)能提供連續性的高基因表達。

本品是PEI25K的無菌溶液,濃度為1mg/ml,直接使用即可。按照DNA:PEI25K=1:3的比例來操作,1ml本品足以用來轉染330μg DNA,或者,6孔板內約做80-160次轉染。

保存與運輸方法

保存:-20℃保存,1年有效。

運輸:冰袋運輸。

注意事項

1)收到本品或第一次使用,請根據單次用量分裝后置于-20℃凍存,盡量降低反復凍融次數。

2)本品為無菌溶液,請操作過程中執行無菌操作。

3)請務必使用高質量的無內毒素質粒。通過260 nm光吸收測定DNA濃度,260nm / 280nm比值確定DNA純度(比值應該在1.8~2.0的范圍之內)。如有可能,請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質粒的完整性。

4)使用適當保存和經常傳代的健康細胞。確保培養基沒有被細菌、真菌或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞,請在轉染前至少傳代兩次。

5)對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,在轉染前兩天鋪板可顯著提高重組蛋白的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,可適當降低鋪板密度,以確保轉染時細胞的匯合度仍為60-80%。

6)對于接觸抑制敏感的細胞,可適當降低鋪板密度。

7)推薦用商業化的無血清培養基比如Opti-MEM I來稀釋DNA和PEI25K,制備轉染復合物。

8)轉染過程請不要使用抗生素。

9)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

一、操作方法(貼壁細胞)

1.1鋪板

a)轉染前18-24h進行鋪板,調整合適的細胞密度(參考表1),使其在轉染時細胞密度達60-80%。

【注意】:高血清水平會抑制轉染效率,大多數情況,低血清水平(≤5%)能產生最高的轉染效率。

1.2轉染步驟(以6孔板的單孔為例)

a)轉染前1-2h,每孔替換為3ml含2%血清的新鮮生長培養基。

b)制備PEI25K-DNA轉染復合物(嚴格按照以下步驟進行):①往300μl無血清培養基(比如:Opti-MEM I)加入2μg質粒DNA,低速混合/渦旋均勻;②往混合物內加入6μl PEI25K(1mg/ml)(DNA/PEI25K=1:3),低速渦旋5s;③無菌環境,室溫靜置30min以形成PEI25K-DNA轉染復合物。④用移液槍上下吹打3次,輕輕混勻。

c)將PEI25K-DNA轉染復合物轉到孔內。輕輕晃動培養皿或輕微渦旋,使得復合物分散均勻。

【注意】:以上步驟可通過調整PEI25K-DNA復合物在無血清培養基內的體積(為培養總體積的10%)來進行放大或縮?。蓞⒖急?)。

1.3 孵育

a)37℃,5% CO2培養箱內培養細胞,轉染后12-18h,去除含PEI25K-DNA復合物的培養液,更換新鮮的生長培養基。

b)通常,轉染后36-48h能檢測到重組蛋白表達。一般在轉染后72-96h能觀察到最大水平的表達。

 

PEI25K客戶使用案例(逐步增加中)

 

圖片描述:以人結腸癌細胞(HCT116)為對象,按照質粒DNA:PEI 2,5000(MX2202-250MG)=1:4的比例制備轉染混合物并轉染進入HCT116細胞,36h后于熒光顯微鏡下觀察轉染效率(GFP,綠色熒光蛋白)。

【數據來源:廈門大學 于老師】

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貨號

名稱

規格

MX2202-250MG

Polyethylenimine Linear, MW 25000線性化聚乙烯亞胺PEI 25000

250mg

MX2203-250MG

Polyethylenimine Linear, MW 40000 (PEI 40K)線性化聚乙烯亞胺PEI 40000

250mg

MX2204-1ML

PEI 25K Transfection Reagent線性化聚乙烯亞胺轉染試劑

1ml

MX2205-1ML

PEI 40K Transfection Reagent線性化聚乙烯亞胺轉染試劑

1ml

MX2211-0.15ML

Lipo2000 Transfection Reagent Lipo2000脂質體轉染試劑

0.15ml

MX2216-0.5KIT

CPFect siRNA/miRNA Transfection Kit CPFect小分子RNA轉染試劑盒

0.5kit

 

 

  — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸集奇生物/MKBio懋康所有】

 

 

      上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作,主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。

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