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10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP) 過氧化氫探針
目錄號 MX5203-1MG 售價 339.00元
規格 1mg 運輸溫度 冰袋運輸
其他名稱 N-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine N-乙?;?3,7-二羥基吩嗪;ADHP;Amplex® Red Reagent;A 6550;Ampliflu™ Red 熒光紅染 保存溫度 -20℃避光干燥保存
CAS號 119171-73-2 有效期 2年
應用 過氧化氫探針 訂購數量
產品簡介:

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP) 過氧化氫探針

(Amplex® Red H2O2 probe 過氧化氫探針)

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搜索關鍵詞:

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP);Amplex®Red; Resorufin 試鹵靈;過氧化氫探針;Ampliflu? Red;CAS NO:119171-73-2;

 

基本介紹:

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP),中文名10-乙?;?3,7-二羥基吩嗪,以商標名Amplex®Red在市場上銷售。ADHP是一種高度靈敏和穩定的過氧化物酶底物,選擇性檢測過氧化氫(H2O2)。存在辣根過氧化物酶(HRP)的體系中,這一基本無色和非熒光的ADHP與H2O2以1:1的化學定量比反應,生成強紅色熒光的試鹵靈(Resorufin)(Ex/Em= 571/585nm),可通過熒光光度計和酶標儀分析結果。許多酶反應能產生H2O2,因此,ADHP能夠用在偶聯酶促反應中檢測許多不同酶的生物活性。

 

工作原理:

Fig 1. 使用ADHP進行偶聯酶促反應的工作原理。葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化生成過氧化氫(H2O2),通過辣根過氧化物酶(HRP)催化ADHP反應生成強熒光試鹵靈(Resorufin)。

 

產品應用:

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP)是目前位置最靈敏和穩定的熒光探針用來檢測HRP和H2O2。

A)  ADHP普遍用來檢測許多免疫實驗中的HRP;

B)  ADHP用來檢測微量的H2O2;


Zhou, M.等研究表明ADHP(Amplex®Red)檢測過氧化物酶活性,最少能檢測1×10?5U/mL HRP;或H2O2,最少能檢測50nM H2O2?!疚墨I來源:Zhou M et al. A stable nonfluorescent derivative of resorufin for the fluorometric determination of trace hydrogen peroxide: applications in detecting the activity of phagocyte NADPH oxidase and other oxidases. Anal Biochem. 1997 Nov 15;253(2):162-8.】

 

基本特性:

1)   CAS NO.:119171-73-2

2)   化學名:1-(3,7-dihydroxy-10H-phenoxazin-10-yl)-ethanone; 10H-Phenoxazine-3,7-diol, 10-acetyl-;

3)   同義名:N-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine N-乙?;?3,7-二羥基吩嗪;ADHP;Amplex®Red Reagent;A 6550;Ampliflu? Red 熒光紅染料;

4)   分子式:C14H11NO4

5)   分子量:257.25

6)   純度:≥98%

7)   摩爾消光系數(ε):54,000 (Resorufin)

8)   Ex/Em:571/585nm (pH 9.0, Resorufin)

9)   溶解性:溶于DMSO、DMF

10)  化學結構式: 

 

ADHP的應用實例:

文獻來源:Summers FA et al. Photooxidation of Amplex Red to resorufin: implications of exposing the Amplex Red assay to light. Methods Enzymol. 2013;526:1-17.


實驗1)Amplex Red Assay

Reactions containing 50 μM Amplex Red reagent, 0.1 U/mL HRP, H2O2 and 0.5 U/mL catalase in 50 mM sodium phosphate buffer, pH 7.4, as indicated in the figure legends, were prepared in a darkroom under a red light. White ELISA plates containing the samples (100 μL/well) in triplicate were either kept in the dark for 30 and 60 min or under ambient laboratory light. The fluorescence (excitation 535 nm, emission 595 nm) was measured on a GENios platereader (Tecan, Durham, NC, USA).


實驗2)Cell Culture Assay

HaCaT keratinocytes were incubated with 50 μM Amplex Red in PBS for 1 h at 37°C in the dark, then cells were irradiated using UVA (315–400 nm) from four fluorescent PUVA lamps (Houvalite F20T12BL-HO; National Biological Co., Twinsburg, OH) for 15 minutes (3.75 J/cm2) and 30 minutes (7.5 J/cm2). Control cells were treated with the same conditions. After exposure, the fluorescence (excitation 535 nm, emission 595 nm) was recorded using a plate reader.


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貨號

產品名稱

規格          

價格(元) 

MX5203-1MG     

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP) 過氧化氫探針

1mg

339

MX5203-5MG

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP) 過氧化氫探針   

5mg

1429

MX5203-25MG

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP) 過氧化氫探針

25mg

4489

 

注意事項

1)   ADHP的使用比較方便,可配制10-20mM DMSO儲存液,之后用反應緩沖液比如PBS,Tris buffer稀釋到50-200μM工作濃度用于檢測。最佳的工作濃度需根據自身實驗需求進行優化。

2)   Amplex®Red是Life Technologies公司的注冊商標名。

3)   為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】


上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作,主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。


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