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Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas,≥500 units/mg protein 脫氧核糖核酸酶I,來源于牛胰腺
目錄號 MF0402-10MG 售價 250.00元
規格 10mg 運輸溫度 冰袋
其他名稱 Deoxyribonucleate 5’-oligonucleotidohydrolase, Deoxyribonuclease A 脫氧核糖核酸 5′-寡核苷酸水解酶,脫氧核糖核酸酶A 保存溫度 -20°C干燥保存
CAS號 9003-98-9 有效期 3年
應用 去除蛋白或RNA樣品中的DNA 訂購數量
產品簡介:

DNase I from Bovine Pancreas, ≥500 units/mg protein

脫氧核糖核酸酶I (DNase I),來源于牛胰腺


關鍵詞:

Deoxyribonucleate 5 –Oligonucleotidohydrolase,5′-寡核苷酸-水解酶,Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas,EC No: 3.1.21.1,CAS NO:9003-98-9


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價格    

Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥500 units/mg protein   

脫氧核糖核酸酶I,來源于牛胰腺

MF0402-10MG   

10MG  

-20oC

250

MF0402-50MG

50MG

-20oC

680


產品描述

脫氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,縮寫DNase I,在大多數細胞和組織中都能發現的一種核酸內切酶,偏好切割鄰近嘧啶的磷酸二酯鍵,產生5’端為磷酸基團、3’端為羥基的多聚核苷酸,平均消化產物最小為多聚四核苷酸。Mg2+存在條件下,DNase I可隨機識別和切斷DNA任一條鏈上的任意位點;而在Mn2+存在條件下,DNase I識別DNA的兩條鏈并在幾乎相同的位點進行切割。DNase I可水解多種形式DNA,如單鏈DNA、雙鏈DNA,甚至染色質(其切割速率受組蛋白影響)。


脫氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,縮寫DNase I,最早從胰腺中分離而來,至今哺乳動物胰腺也是最主要的來源之一。DNase I以兩對二硫鍵結合的多種糖蛋白混合形式存在。最佳的工作范圍是pH 7-8,DNase的活性依賴于Ca2+,并可被二價金屬離子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。5mM Ca2+可保護酶使其不被水解,而0.1mM Ca2+可使酶失活速率降至原來的1/2。


本品來自牛胰腺,親和色譜純化制備所得,常用于去除蛋白或RNA樣品中的DNA,或者用于向DNA中引入缺口使標記堿基插入DNA。本品以凍干粉形式供應,比活≥500 Kunit Units/mg蛋白。


產品特性

1)   CAS NO:9003-98-9

2)   分子量:~31 kDa

3)   同義名:DNase I, Deoxyribonucleate 5’-oligonucleotidohydrolase, Deoxyribonuclease A 脫氧核糖核酸 5′-寡核苷酸水解酶,脫氧核糖核酸酶A

4)   比活力:≥500 Kunit Units/mg protein

5)   活力定義:在50μl含40mM Tris-HCl, pH8.0,2.5 mM MgSO4,1mM CaCl2的反應緩沖體系中,37℃,10min內完全降解1μg λ-DNA所需的酶量即為一個活力單位。此反應條件下得到的一個單位DNase活力約等于一個Kuntiz unit。

6)   激活劑:多種二價金屬離子如Mg2+、Mn2+、 Ca2+、Co2+、and Zn2+

7)   抑制劑:EGTA,EDTA,鹽離子濃度(>100mM)都能降低DNase活性

8)   熱失活:含終止溶液(20mM EGTA,pH 8.0)內65℃,處理10min

9)   溶解性:溶于緩沖液(≥1mg/ml in 20mM Tris-HCl(pH 7.5), 1mM MgCl2, 50% 甘油)


保存與運輸方法

保存:凍干粉-20℃干燥凍存,至少3年穩定。

運輸:冰袋運輸。


使用方法

一、   儲存液制備

將低溫保存的本品置于室溫回溫至少20min,低速短時離心后,加入適量緩沖液配制成至少≥1mg/ml儲存液(如:20mM Tris-HCl(pH 7.5), 1mM MgCl2, 50% 甘油),根據一定用量分裝置于-20℃保存,至少1年穩定。


二、   反應緩沖液制備

建議1×反應緩沖液:40mM Tris-HCl(pH 8.0), 2.5mM (up to 10mM) MgSO4,1mM (up to 10mM) CaCl2

【注意】:當起始原料含EGTA,EDTA,其他螯合劑,和/或高濃度鹽離子,此時反應緩沖液需更高濃度的Mg2+和Ca2+。


三、使用步驟(作為參考,具體實驗可做適當調整)

2.1 往一個RNase-free PCR管內加入:1μg RNA樣本;49 μl 1×反應緩沖液;1 μl DNase I, 1 unit/ml;【注意:酶的實際比活力請見產品標簽】,混勻。

2.2 37℃孵育10-15min?!咀⒁猓合瘯r間不要超過15min或消化溫度不要高于37℃,否則殘留的RNase A污染可能會開始降解RNA】

2.3 加入1μl終止液(20mM EGTA,pH 8.0)結合Ca2+和Mg2+,之后于65-70℃失活10min,終止反應?!咀⒁猓罕仨氃跓崾Щ钪凹尤虢K止液】


注意事項

1)  在不同的反應緩沖體系內,用來完全消化一定量DNA所需的DNase I量不同,請根據具體的工作體系或實驗經驗來決定?!咀⒁猓蝴}濃度>100mM會降低DNase I活性】

2)  為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


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貨號

名稱

規格

MF0402-10MG     

Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥500 units/mg protein

10MG       

MF0401-15KU

Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥2,000 units/mg protein   

15KU

MF0203-100MG

Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas

100mg

MP1509-25KU

Benzonase Nuclease全能核酸酶

25KU

MF0201-100MG

Proteinase K, Molecular Biology Grade蛋白酶K

100mg


注意事項

為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

 

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作,主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。

 

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